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產(chǎn)品目錄

百迪雜交瘤無血清培養(yǎng)基1000ml

品名: 百迪雜交瘤無血清培養(yǎng)基1000ml
型號: S109-1000
  • 產(chǎn)品詳情
  • 規(guī)格參數(shù)

產(chǎn)品信息

適用范圍試劑
使用方法直接適應(yīng)
1. 預(yù)熱無血清培養(yǎng)基及添加劑,將添加劑按1:10的比例添加至無血清培養(yǎng)基,配制成雜交瘤完全培養(yǎng)基,雜交瘤細(xì)胞傳代至完全培養(yǎng)基。在適應(yīng)過程中,細(xì)胞傳代密度應(yīng)是正常傳代密度的兩倍。
2. 監(jiān)測細(xì)胞生長,直到活細(xì)胞密度達(dá)到1×106個(gè)活細(xì)胞/mL。在新鮮預(yù)熱的雜交瘤完全培養(yǎng)基中傳代至活細(xì)胞密度為1-2×105個(gè)活細(xì)胞/mL。
3. 繼續(xù)監(jiān)測和傳代細(xì)胞3-5代,細(xì)胞倍增時(shí)間不低于之前培養(yǎng)基時(shí),認(rèn)為此步驟培養(yǎng)基適應(yīng)已經(jīng)完成。
連續(xù)適應(yīng)
1. 將原培養(yǎng)基與雜交瘤完全培養(yǎng)基以3:1的比例混合,雜交瘤細(xì)胞接種至新鮮預(yù)熱的混合后培養(yǎng)基。在適應(yīng)過程中,傳代密度應(yīng)是正常傳代密度的兩倍。
2. 監(jiān)測細(xì)胞生長,直到活細(xì)胞密度達(dá)到1 × 106個(gè)活細(xì)胞/mL。將原培養(yǎng)基的比例逐步減少 (1:1,1:3,1:9),直至雜交瘤細(xì)胞接種于100%的雜交瘤完全培養(yǎng)基。傳代密度為1-2x105個(gè)活細(xì)胞/ml。
3. 繼續(xù)監(jiān)測和傳代細(xì)胞,在100%完整的雜交瘤完全培養(yǎng)基中持續(xù)生長和存活幾代后,細(xì)胞倍增時(shí)間不低于之前培養(yǎng)基時(shí),認(rèn)為此步驟培養(yǎng)基適應(yīng)已經(jīng)完成。
蛋白表達(dá)
1. 雜交瘤細(xì)胞接種密度0.5-1×106 /mL, 培養(yǎng)溫度36.5~37.0℃,pH:7.1±0.2,DO: 40%。(搖床中建議轉(zhuǎn)速120rpm,振幅50mm, 5-8%CO2 )。
2. 第一次補(bǔ)料:當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到2.5×106 /mL或培養(yǎng)48h時(shí)開始補(bǔ)第一次料:3%補(bǔ)料 +4mM谷氨酰胺,葡萄糖控制到4g/L;
3. 第二次補(bǔ)料:當(dāng)培養(yǎng)至96h時(shí)補(bǔ)第二次料:3%補(bǔ)料+4mM谷氨酰胺,葡萄糖控制到4g/L;當(dāng)細(xì)胞活率低于50%時(shí),培養(yǎng)結(jié)束;
注意事項(xiàng)1. 本產(chǎn)品使用過程中應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2. 試劑包裝如有破損或滴漏,嚴(yán)禁使用。
3. 為保持本產(chǎn)品的最佳使用效果,請勿進(jìn)行凍融處理;
4. 禁止使用超出規(guī)定有效期的產(chǎn)品。
5. 由于本培養(yǎng)基含有谷氨酰胺,因此建議液體培養(yǎng)基超過3個(gè)月時(shí)補(bǔ)加2-4 mM谷氨酰胺。
聲明僅用于科研使用,不能用于臨床診斷和治療。
保存條件2℃-8°C避光保存,有效期12個(gè)月。

產(chǎn)品詳情

BDBIO 雜交瘤無血清培養(yǎng)基是一種無動(dòng)物源,化學(xué)成分限定培養(yǎng)基。雜交瘤無血清培養(yǎng)基為初始培養(yǎng)基,含有4mM的谷氨酰胺,為雜交瘤細(xì)胞生長提供均衡的營養(yǎng),與雜交瘤添加劑搭配使用可支持雜交瘤細(xì)胞的高密度培養(yǎng)。適用于人、小鼠和大鼠雜交瘤及骨髓瘤細(xì)胞的培養(yǎng)、單克隆抗體和重組蛋白的表達(dá)。


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