- 品名： 百迪羊水細(xì)胞培養(yǎng)基100ml
- 型號(hào)： S205-100
- 產(chǎn)品詳情
- 規(guī)格參數(shù)
產(chǎn)品信息
| 適用范圍 | 試劑 |
|---|---|
| 使用方法 | 【適用儀器】 顯微鏡、二氧化碳細(xì)胞培養(yǎng)箱、離心機(jī)。 【樣本要求】 新鮮采集的羊水細(xì)胞或絨毛膜細(xì)胞效果最佳。 【檢驗(yàn)方法】 1. 在無菌條件下抽取妊娠16-21周羊水約20-30ml，平均注入2-3支15ml一次性離心管中。 2. 將含有羊水的離心管以400g 離心10min。 3. 去上清液，每管底約留0.5ml，制成細(xì)胞懸液，再加入約3-5ml 羊水細(xì)胞培養(yǎng)基，充分混 勻，轉(zhuǎn)移至T25 培養(yǎng)瓶中，置于5% CO2 37℃溫箱進(jìn)行培養(yǎng)。 4. 一般5 天后鏡下觀察，可見成纖維樣或上皮細(xì)胞生長(zhǎng)，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)旺盛，在貼壁細(xì)胞層 的背景上出現(xiàn)圓形細(xì)胞時(shí)，視情況（有較好的梭形細(xì)胞克隆）可更換上羊水細(xì)胞培養(yǎng)基， 繼續(xù)培養(yǎng)24-48 小時(shí)。 5. 終止培養(yǎng)：加入秋水酰胺溶液，使終濃度為0.1μg/ml，4-6（3-4 小時(shí)）小時(shí)左右進(jìn)行 細(xì)胞學(xué)處理，胰酶消化后收集細(xì)胞懸液，1000rpm離心10min去上清。 6. 低滲：加入約2ml低滲溶液混勻（0.075M KCI），37℃水浴3-5min。 7. 預(yù)固定：加入1.5ml新鮮、預(yù)冷的固定液（冰醋酸：甲醇=1：3的比例配置固定液），37℃ 水浴5min，1800rpm離心10min去上清。 8. 固定：緩慢加入2ml新鮮、預(yù)冷的固定液，37℃水浴10min，1500rpm離心10min去上 清。 9. 再次固定：加入2ml新鮮、預(yù)冷的固定液，37℃水浴10min，離心1500rpm離心10min 去上清。 10. 根據(jù)管底細(xì)胞量適當(dāng)加入幾滴新鮮固定液。 11. 制片：將細(xì)胞液滴在冰凍玻片上，每片1-2 滴。 12. 烤片：75℃烤箱烘烤3 小時(shí)（37℃或60℃孵箱中過夜或80℃ 3小時(shí)）。 13. 顯帶處理：取胰酶分帶溶液（0.25%）5ml，加入45ml生理鹽水染色缸中（使終濃度為 0.025%），用1N HCl或1N NaOH調(diào)節(jié)pH=7.0，置于37℃預(yù)溫，將烤好的玻片標(biāo)本放 入胰酶分帶溶液中處理60s左右（輕輕搖動(dòng)）。 14. 取出玻片標(biāo)本，在37℃預(yù)溫的生理鹽水中漂洗玻片。 15. 將玻片標(biāo)本放入37℃預(yù)溫的吉姆薩工作液中，染色5-10分鐘。 16. 自來水沖洗，自然晾干后，分析中期染色體并解釋結(jié)果。 【陽性判斷值或者參考區(qū)間】 細(xì)胞倍增指數(shù)大于2 【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】 1. 固定液每次使用必須新鮮配制，否則將會(huì)形成酯類，形成背景較為明顯，從而影響制片 效果。 2. 細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間、加入秋水酰胺的量以及低滲操作時(shí)間等因素都會(huì)影響樣品制備效果，需 要根據(jù)實(shí)際樣本及實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。 3. 如果標(biāo)本來自于妊娠第9個(gè)月的患者，則細(xì)胞沉淀可能較大但活細(xì)胞含量較少，因此需要 較大的接種密度（少于正常量的培養(yǎng)基）。 【檢驗(yàn)方法的局限性】 僅用于培養(yǎng)羊水細(xì)胞、絨毛膜細(xì)胞。 |
| 注意事項(xiàng) | 1. 羊水細(xì)胞培養(yǎng)基短期內(nèi)可放4-8℃保存，若長(zhǎng)期儲(chǔ)存，應(yīng)放-20℃保存，不可反復(fù)凍融。 2. 本產(chǎn)品只用于體外診斷，操作過程應(yīng)避免污染；操作人員在檢驗(yàn)時(shí)應(yīng)做好防護(hù)，預(yù)防疾 病傳播。 3. 試劑包裝如有破損或滴漏，嚴(yán)禁使用。 4. 溶液應(yīng)為澄清，如有沉淀物，嚴(yán)禁使用。 5. 禁止使用超出規(guī)定有效期的產(chǎn)品。 |
| 聲明 | 僅用于科研使用，不能用于臨床診斷和治療。 |
| 保存條件 | 培養(yǎng)基應(yīng)在-20℃避光儲(chǔ)存，有效期為24個(gè)月。 |
產(chǎn)品詳情
主要組成成分：基礎(chǔ)培養(yǎng)基、胎牛血清、胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、生長(zhǎng)因子、純化水。
將人羊水細(xì)胞或采集的絨毛樣品在羊水細(xì)胞培養(yǎng)基中短暫培養(yǎng)后，進(jìn)行后續(xù)核型分析或其他 產(chǎn)前基因檢測(cè)。
暫無內(nèi)容...
