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產(chǎn)品目錄

百迪人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶

品名: 百迪人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶
品牌: 百迪生物
型號(hào): C5070
  • 產(chǎn)品詳情
  • 規(guī)格參數(shù)

產(chǎn)品概述

來(lái)源皮膚
形態(tài)貼壁、上皮樣
培養(yǎng)高糖DMEM培養(yǎng)基+10%FBS 37℃ 5%CO2
傳代0.25%胰蛋白酶消化4-10min,比例1:2-1:4
產(chǎn)品簡(jiǎn)介人永生化角質(zhì)細(xì)胞((Human immortalized keratinocytes cells))HaCat來(lái)源于正常成年人的皮膚組織,經(jīng)體外培養(yǎng)后自發(fā)轉(zhuǎn)化為永生化的人角質(zhì)細(xì)胞。此細(xì)胞為貼壁生長(zhǎng)、呈現(xiàn)上皮樣。廣泛用于皮膚疾病的研究,如銀屑病、濕疹等疾病的發(fā)病機(jī)制,評(píng)估藥物和化妝品對(duì)皮膚細(xì)胞的影響,進(jìn)行毒性測(cè)試和藥效研究等。
收貨指南1. T25細(xì)胞瓶到貨后處理方案:
(1) 驗(yàn)貨:培養(yǎng)瓶上標(biāo)簽、培養(yǎng)瓶完好性以及瓶口是否有漏液;
(2) 處置:75%酒精對(duì)培養(yǎng)瓶消毒后,放入37℃,5% CO2的培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)后,進(jìn)行顯微觀察、拍照,作為售后維權(quán)依據(jù);
(3)注意:貼壁細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中發(fā)生細(xì)胞脫落,這是正?,F(xiàn)象,靜置后可恢復(fù)貼壁。
2. 凍存管到貨后處理方案:
(1) 驗(yàn)貨:包裝的標(biāo)簽、包裝內(nèi)是否有干冰、凍存管完好性;
(2) 處置:盡快復(fù)蘇(見(jiàn)培養(yǎng)方法)或程序降溫后轉(zhuǎn)移至液氮中保存。
培養(yǎng)方法1.培養(yǎng)基:
89% 高糖DMEM 培養(yǎng)基;10% 胎牛血清(FBS);1%青霉素-鏈霉素(P/S)。
2. 復(fù)蘇:
(1)解凍:用鑷子將凍存管浸于37 ℃水浴;反復(fù)搖晃,迅速完成解凍;
(2)離心:噴灑75%酒精消毒后,在無(wú)菌環(huán)境下,打開(kāi)凍存瓶,用移液器將細(xì)胞連同凍存液移至含1 mL完全培養(yǎng)基的10 mL離心管中,室溫1200 rpm離心3-5 min,細(xì)胞沉于離心管底部;
(3)培養(yǎng):將上清液輕輕棄去,加2 mL完全培養(yǎng)基,輕柔懸起細(xì)胞,然后將所有細(xì)胞懸液移至含有3 mL完全培養(yǎng)基的T25培養(yǎng)瓶中,于37 ℃,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
(4)觀察:每日觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)(培養(yǎng)基顏色、細(xì)胞貼壁情況、形態(tài)與密度等)并拍照。
3. 傳代:
細(xì)胞密度達(dá)80%-90%開(kāi)始傳代
(1)清洗:無(wú)菌下吸出培養(yǎng)基,用37 ℃預(yù)熱的PBS清洗一次;
(2)消化:加1 mL 0.25%胰蛋白酶消化液,轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶令其浸潤(rùn)所有細(xì)胞,室溫(或37 ℃)消化,顯微鏡下觀察到細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回超凈臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1 mL完全培養(yǎng)基終止消化;
(3)離心:用移液器輕柔吹勻后然后將懸液轉(zhuǎn)移至10 mL離心管中,在1200 rpm離心3-5 min;
(4)培養(yǎng):無(wú)菌下棄上清液,加1 mL完全培養(yǎng)基懸起細(xì)胞并移至T25培養(yǎng)瓶中;按1∶ 2-1∶ 4比例添加完全培養(yǎng)基,用移液器輕柔吹勻后,分裝至培養(yǎng)瓶中,于37 ℃,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
生物安全等級(jí)1請(qǐng)?jiān)跓o(wú)菌環(huán)境中操作,避免污染;為了保護(hù)細(xì)胞的穩(wěn)定性,細(xì)胞傳代次數(shù)不宜過(guò)多;為了結(jié)果的可靠性,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)良好;嚴(yán)格遵守生物安全操作規(guī)程。
免責(zé)聲明本產(chǎn)品僅用于科研目的,不得用于臨床診斷、治療等用途。用戶應(yīng)遵循國(guó)家和地區(qū)的法律法規(guī),自行承擔(dān)使用本產(chǎn)品所產(chǎn)生的一切風(fēng)險(xiǎn)和責(zé)任。請(qǐng)?jiān)谑褂们白屑?xì)閱讀本說(shuō)明書(shū),并按照指導(dǎo)操作。如有任何疑問(wèn)或需要進(jìn)一步信息,請(qǐng)與我們聯(lián)系。

產(chǎn)品詳情


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