| 本制品是從全血中提取適合各種實驗用的高純度DNA的試劑盒。標準的操作規(guī)程是使用100 μl 的血液量，但實際操作時也可以處理更多量的血液。本試劑盒含有GenTLE Solution I、II、III三種溶液。其中GenTLE Solution I 的作用是在破壞血細胞的同時，與核酸形成電中性的復合體。將該復合體離心收集并用GenTLE Solution II 清洗后，在沉淀中加入GenTLE Solution III，將DNA分離出來，然后再加入異丙醇將DNA沉淀回收。整個操作只需40分鐘左右，便可提取高純度的DNA，操作十分簡單方便。由于GenTLE Solution I 具有破壞菌體和病毒粒子的作用，這對于處理那些擔心有可能發(fā)生病源菌等污染的樣品非常有利。而且GenTLE Solution I 與核酸生成的復合體牢固、穩(wěn)定，便于樣品的運輸以及大量樣品的處理。本試劑盒既適用于尚未凝固的全血，又適用于經(jīng)各種抗凝劑 (檸檬酸、EDTA、肝素) 處理過的全血，無論經(jīng)過哪種抗凝劑處理，每100 μl 人的血液都能得到1 μg 以上的 DNA，其純度A260/A280可達1.8～2.0。提取的DNA可用于PCR擴增和限制酶切等實驗。 ■ 保存室溫*。* GenTLE Solution I 和GenTLE Solution II 在20℃以下時有可能產(chǎn)生沉淀。此時，請按照注意事項1.和2.中所介紹的方法使沉淀完全溶解后使用。 ■ 實驗操作流程圖 ■ 注意事項1. GenTLE Solution I 保存于20℃以下時，有時會出現(xiàn)沉淀，所以最好于20℃以上保存。如出現(xiàn)沉淀，可在50℃～55℃加熱1～2小時，使沉淀完全溶解后使用。但是請注意， 60℃以上加熱時，性能可能會有所下降。2. GenTLE Solution II 出現(xiàn)沉淀時，請離心取上清使用。3. GenTLE Solution I 有引起燒傷的危險。一旦濺入眼中或觸到皮膚上，請立即用大量水沖洗。4. 氣溫低時，GenTLE Solution I 的粘度增大，有時較難吸取，此時請于37℃加熱數(shù)分鐘后使用。5. 為防止污染，分裝時請使用新的滅過菌的Tip。6. DNA的收量，會因抗凝劑的種類以及血液的保存條件的不同而各異。使用之前請務必閱讀“采血后樣品的處理、保存和DNA收量”部分。7. 檸檬酸、EDTA、肝素三種抗凝劑均可使用。但肝素對酶反應有可能起阻害作用，采血時如沒有特殊要求，請使用檸檬酸或EDTA處理血樣。8. 提取后的DNA，請用TE溶解，溶解后的DNA冷凍或4℃保存都可以。但如果用滅菌蒸餾水溶解，請務必冷凍保存，以防止DNA分解。 |
