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產(chǎn)品目錄

TaKaRa 含有UNG酶的Taq? HS PCR 試劑盒

品名: TaKaRa 含有UNG酶的Taq? HS PCR 試劑盒
品牌: TaKaRa
型號(hào): R013S
  • 產(chǎn)品詳情
  • 規(guī)格參數(shù)
  • 商品名稱:TaKaRa Taq HS PCR Kit, UNG plus

  • 商品編號(hào):SPU2021050466

  • 上架時(shí)間:2022-01-04


■ 制品內(nèi)容 (Code No.: R013A : 50 μl反應(yīng)×200次量)
TaKaRa Taq HS (5U/μl)50 μl10 × PCR Buffer for UNG plus*1 (10 ×)1 mldU plus dNTP Mixture*2 (12.5 ×)800 μlUNG (2 U/μl)100 μl  *1 Mg2+濃度:22.5 mM (10×)因dUTP的濃度設(shè)定是dTTP的3倍,所以總體dNTP的濃度變高,雖然PCR Buffer中含有MgCl2,但為了保持MgCl2與dNTP量的平衡,本制品中的Mg2+濃度高于TaKaRa Taq Hot Start Version (Code No. R007A)附帶的10× PCR Buffer (Mg2+ plus)。*2 dU plus dNTP Mixture:dUTP 7.5 mM、dATP 2.5 mM、dGTP 2.5 mM、dCTP 2.5 mM 

■ 制品說(shuō)明
PCR是一種非常敏感的DNA擴(kuò)增技術(shù),易受污染影響,PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的污染會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性結(jié)果。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的污染是End-point PCR方法,特別在食品、環(huán)境檢測(cè)中是令人頭痛的問(wèn)題。
本制品是一種可防止假陽(yáng)性產(chǎn)生的試劑盒。使用本制品是在PCR反應(yīng)時(shí)以dUTP取代dTTP,并同時(shí)使用Hot Start型DNA聚合酶TaKaRa Taq HS進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。反應(yīng)液配制后,對(duì)含有dU的DNA具有降解作用的UNG酶(Uracil-N-glycosylase)可選擇性水解含有尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,而對(duì)不含尿嘧啶的模板無(wú)任何影響。
UNG的作用原理:在PCR反應(yīng)前25℃、10分鐘反應(yīng)中,UNG酶可水解PCR反應(yīng)液中含有尿嘧啶的PCR產(chǎn)物的尿嘧啶堿基和糖磷酸骨架的N-糖苷鍵,產(chǎn)生脫嘧啶位點(diǎn)。隨后進(jìn)行95℃、2分鐘熱處理,在UNG酶失活的同時(shí)進(jìn)一步對(duì)磷酸骨架水解,從而消除含有尿嘧啶的PCR產(chǎn)物的污染。
UNG酶可以作用于單鏈或雙鏈DNA,對(duì)RNA無(wú)活性。

 ■ 保存-20℃。 ■ 注意事項(xiàng)從反應(yīng)液的配制到PCR產(chǎn)物的檢出應(yīng)分別在4個(gè)操作區(qū)操作,操作區(qū)推薦進(jìn)行物理性隔離。操作區(qū)1:反應(yīng)液的配制及分裝。操作區(qū)2:樣品的制備。操作區(qū)3:將樣品添加到反應(yīng)液中。操作區(qū)4:PCR反應(yīng)及凝膠電泳對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行檢出。為防止污染,除在操作區(qū)4外,請(qǐng)避免對(duì)裝有PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的tube進(jìn)行開(kāi)閉。  
TaKaRaTaq?HSPCRKit,UNGplus
品牌CodeNo.產(chǎn)品名稱包裝量
TakaraR013STaKaRaTaq?HSPCRKit,UNGplus50次
TakaraR013ATaKaRaTaq?HSPCRKit,UNGplus200次


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